1、 实验前都需要准备什么？
1）要通过酶标仪测试的板子，如（不限于）96/384/1536孔板。
2）查阅资料，明确自己要使用的方法，如需要测量固定的波长，记录下来，以便在仪器上设置。
3）如果需要检测前添加试剂，需要自备移液枪及枪头。
2、多功能酶标仪EnVision都可以测量什么？
1）Absorbance为光吸收检测，如检测ELISA, CCK8，MTT，BCA，单位为OD值；
2）HTS AlphaScreen是Alpha检测，单位为Count per second（CPS）；
3）Fluorescence Intensity 为荧光强度检测，如检测ROS探针，细胞死活（PI），单位为RFU；
4）Fluorescence Polarization为荧光偏振检测，单位为mP；
5）Ultra Sensitive Luminescence 为超敏化学发光，如检测双荧光素酶，ATP等，单位为CPS；
6）Luminescence为普通灵敏度化学发光，如检测BRET，单位为CPS；
7）DELFIA为时间分辨荧光，如检测cAMP，单位为Counts；
8）LANCE为均向时间分辨荧光，如检测HTRF，单位为Counts。
3、仪器和软件未连接怎么办？
需要先开仪器，再打开软件。如果没有连上，关闭软件再重新打开。如果仍旧没有反应，请及时联系实验员。
4、Protocol该使用哪一个？
常用的Abs、FI、Luminscence检测，一般不自己单独保存一个程序，可用公共的protocol进行更改检测。由于很多人都会使用相同protocol，所以每一次检测前都要重新确认参数，以免检测错误。以实验室/PI名称建立文件夹亦可，方便回溯结果。
5、使用时，如果protocol为灰色是什么情况？
该程序缺少对应组件，点击protocol右边按钮查看缺少的是Aperture，filter还是mirror。可联系管理员老师进行更换。
6、酶标仪最少可以测量的液体体积是多少？
最少要铺满要检测板子的板底。
7、酶标仪可以使用的板子类型有哪些？
可参考服务指南中“如何选择适合的Assay微孔板”进行选择，如果有需要可以到平台进行购买。
非SBS标准的孔板或自制芯片等特殊耗材，提前持样板联系管理员老师确认是否可用。
8、化学发光有两个检测模式，luminescence和ultra sensitive luminescence，有什么差别，该怎么选择？
两者的差异在于：
1） ultra sensitive luminescence的光路里面没有光学部件，大幅度减少了光损失，而luminescence需要用到滤光片和二向色镜，对光有一定的削弱，所以ultra sensitive luminescence的灵敏度（信噪比S/B）比luminescence高很多，常见的双荧光素酶、ATP检测等，都首选ultra sensitive luminescence进行检测；
2） 由于ultra sensitive luminescence里面没有光学部件，所以对于某些需要区分波长的化学发光实验，此模式不可用，如BRET，NanoBRET等，此时需要用luminescence；
3） ultra sensitive luminescence的探测器可以直接贴到孔板上进行检测，加上仪器适配的aperture，不仅可以减少信号损失，还减少窜光率，而luminescence无法贴孔测，故窜光率相对较大。
需要注意的是，由于ultra sensitive luminescence的检测器是直接贴孔测的，即Distance between plate and detector（mm）为0；所以对孔板要求比较高，需要整块板的平整度非常好，否则会撞板。为了避免这一问题，一般我们建议可以调高检测其与孔板的距离，比如0.2。特别是如果您在检测前，需要在仪器内进行shake，则Distance between plate and detector（mm）的数值必须＞0.2。
9、 测量化学发光的时候，为什么实时看到所测得的数据，和最终导出来的数据不一样？
答：测量化学发光时，实时显示的数值是在当前设定时间下所测的绝对数值，实时显示的单位是Counts；而导出使用的数值是均一化后的数值，均一化的方式是：当前设定时间下所测的绝对数值/检测的时间，最终的单位是CPS（Count per second）。
10、检测之前可以进行温控和震荡么？
可以。在protocol设定时添加shake和temperature control，并右键move up到measurement之前。
11、Envision可以实现动力学检测么？
可以。Envision可以设置动力学检测次数、间隔时间、震荡、温度，对于钙流检测还可以设置单孔检测次数以及配合自动加样器实现边加样边检测，具体设置方法请联系管理员老师。
12、如何使用Envision 进行光吸收光谱扫描？
如果您的扫描波长包括了230-400nm范围内的波长，必须采用UV底透的孔板。选择Wavelength Scan检测模式，设置Min wavelength（nm）和Max wavelength（nm）处以及步进Step（nm），最小步进为0.1nm。
13、Envision可以做同步荧光光谱扫描么？
可以，但这个实验一般用荧光分光光度计做，用酶标仪做流程会非常复杂。一般而言，△15nm时显示的是蛋白质酪氨酸残基的光谱特性，△60显示的蛋白质色氨酸残基的光谱性质。在进行同步荧光光谱扫描时，需要根据检测光谱，一个一个的进行设置多个measurement，此时wavelength scan是无法使用的，因为wavelength scan是固定一个激发，然后扫描不同的发射波长。
14、酶标仪Envision可以测ROS么？
可以。通过FI检测模式，选择Scan Measurement ，设置单孔多点检测，可添加Avg的计算步骤，检测时会直接会给出单孔均值。具体设置方法，可联系管理员老师。
15、酶标仪Envision可以使用微量板测定OD260，OD280，然后直接给出浓度么？
可以的。首先要有微量板，比如Thermo、Biotek品牌的微量板，并且确保是可以放到Envision的载架上（不掉下去，比如Tecan的nanoqaunt板就会掉下去！）。目前市面上可用的微量板，光程都是0.5mm，需要把它转化为1cm的光程，也就是0.5 x 20=1cm。
dsDNA的浓度计算公式为=（样本260OD-空白260OD）*20*50 ug/ml
ssRNA的浓度的浓度计算公式为=（样本260OD-空白260OD）*20*40 ug/ml
也可以使用常见的UV底透的孔板，比如Corning的3635孔板，加入100ul体积后，光程是0.29cm；200ul是0.56cm。直接转化计算即可。
16、荧光偏振的设置有哪些注意点？
首先是Excitation light（%），如果所测定的荧光值超出了仪器的检测线（数值显示为灰色），那么可以降低激发光的比例，直接调至1%；其次是Detector gain和2nd Detector gain，可以使用软件自动优化，Gain优化的目的是信号不超出仪器检测线的基础上，给出最大的信噪比。具体优化操作可联系管理员老师。
17、酶标仪软件可以对标曲点进行四参数拟合么？
可以。进行标曲拟合时，需要告诉软件标曲的点在孔板上是哪几个，做了几个复孔，浓度分别是多少，在方法设置中选择 Curve fitting实现拟合。
18、其它注意事项：
1）使用时，板子的A放在仪器板架的左上角；
2）使用时，需要将板子的盖子取下再进行测量；
3）仪器使用结束后，将板架load回仪器中。