蛋白质相互作用（PPI）调控着细胞信号传导、代谢、增殖、凋亡等关键生理过程，与癌症、免疫疾病、神经退行性疾病等病理机制密切相关，因此也是药物和探针发现的重要靶点。例如，知名的Venetoclax靶向BCL-2/BAX互作，重启癌细胞凋亡程序。然而，PPI界面通常较为平坦，缺乏可供小分子结合的深沟结构；接触面积大，常超过药物尺寸分子的结合范围；早期PPI筛选方法易受假象干扰，常筛选出具有非药物类作用机制（如基于聚集的抑制或蛋白质变性）的疏水性化合物。

在筛选分子方面，平台的大环化合物库（1w cmpds）可增强结合PPI的特异性；在HTS筛选技术方面，平台的Envision可提供高灵敏的HTRF、Alpha等检测技术，提高命中率。

HTRF是一种结合了时间分辨荧光（TRF）以及荧光共振能量转移（FRET）HTRF（Homogeneous Time-Resolved Fluorescence）的均相检测技术。 使用镧系元素（如铕Eu³⁺、铽Tb³⁺）的穴状化合物作为荧光供体，其荧光寿命长达毫秒级，远超普通荧光染料的纳秒级。通过延迟检测（约50 μs），可滤除背景荧光干扰，显著提高信噪比； 当供体（镧系化合物）与受体（如XL665或d2染料）距离接近（<10 nm）时，供体的能量通过非辐射方式转移至受体，激发受体发出特定波长的荧光信号（如665 nm）。当PPI抑制剂存在时，FRET现象被抑制；F无需洗涤或分离步骤，直接在液相中完成检测，简化操作流程，适用于高通量筛选。

Alpha检测技术，即Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay，也是适配高通量实验的一种均相检测技术，由于 Alpha 技术的信号传递有效距离长达 200 nm，并且具有极佳的侦测灵敏度，相较于 ELISA 或其他均相检测方式，可以很大程度地避免蛋白质分子大小与蛋白质间亲和力大小的限制。

本次平台特联合Revvity就HTRF、Alpha检测技术在PPI应用方面的实验设计和技术细节进行深入介绍。欢迎感兴趣的同学报名参加！

讲座内容：

1. HTRF/Alpha实验设计和优化

2. HTRF/Alpha技术在PPI检测方面的应用

3. 优秀案例介绍

4. 其它想了解的技术细节（二维码报名中可填写）

讲座时间、地点：

2025年5月9日（周五）下午14:00-16:00 

医学科学楼B321（提供小礼品和下午茶）

主讲人：Revvity应用工程师 李凯

扫码报名：

想了解更多PPI均相检测技术的介绍，欢迎线下或线上参与本次技术讲座。

* 线上链接：

药学技术中心活性筛选平台：医学科学楼F017

联系电话：010-62795723